RNAprep Pure Cell/Bacteria Kit

Voor zuivering van hoogwaardig totaal-RNA uit cellen en bacteriën.

De RNAprep Pure Cell/Bacteria Kit biedt een snelle, eenvoudige en kosteneffectieve methode voor het zuiveren van totaal RNA uit gekweekte cellen en bacteriemonsters door gebruik te maken van een effectieve spinkolom en een uniek buffersysteem. De kit bevat RNase-Free Spin Column CR3 voor het zuiveren van hoogwaardig RNA met behulp van silica-membraantechnologie. Hoogwaardig totaal-RNA kan in 30-40 minuten met hoge zuiverheid worden verkregen en is vrij van verontreiniging met eiwitten en genomisch DNA.

Kat. Nee Verpakkingsgrootte:
4992235 50 voorbereidingen

Product detail

Experimenteel voorbeeld

FAQ

Productlabels

Functies

■ Geoptimaliseerde buffers en protocollen voor gekweekte cellen en bacteriemonsters maken het proces eenvoudig en handig.
■ Unieke DNase I minimaliseert besmetting met genomisch DNA.
■ Unieke RNase-vrije filtratiekolommen CS elimineert andere verontreinigingen.
■ Het zeer zuivere en gebruiksklare RNA is geschikt voor gevoelige downstream-toepassingen.
■ Geen extractie met fenol/chloroform, geen neerslag van LiCl en ethanol, geen centrifugatie met een CsCl-gradiënt nodig, wat het proces veilig en betrouwbaar maakt.

Toepassingen

■ RT-PCR.
■ Northern Blot, Dot Blot.
■ Realtime PCR.
■ Chipanalyse.
■ PolyA-screening, in vitro translatie, RNase-beschermingsanalyse en moleculaire klonering.

Alle producten kunnen worden aangepast voor ODM/OEM. Voor details,klik op Aangepaste Service (ODM/OEM)


  • Vorig:
  • Volgende:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×
    Experimental Example Materiaal: Menselijke Jurkat-cellen (1×106 )
    Methode: Het totale RNA van Human Jukat Cells werd geïsoleerd met behulp van de RNAprep Pure Cell/Bacteria Kit.
    Resultaten: Zie de bovenstaande afbeelding van agarosegelelektroforese. Per baan werd 2-4 l van 50 l eluaten geladen. De elektroforese werd uitgevoerd bij 6 V/cm gedurende 30 min op 1% agarosegel.
    Experimental Example Materiaal: TOP10 E.coli (1×108)
    Methode: Het totale RNA van TOP10 E.coli werd geïsoleerd met behulp van de RNAprep Pure Cell/Bacteria Kit.
    Resultaten: Zie de bovenstaande afbeelding van agarosegelelektroforese. Per baan werd 2-4 l van 50 l eluaten geladen. De elektroforese werd uitgevoerd bij 6 V/cm gedurende 30 min op 1% agarosegel.
    V: Kolomblokkering

    A-1 Cellysis of homogenisatie niet voldoende

    ---- Verminder het monstergebruik, verhoog de hoeveelheid lysisbuffer, verhoog de homogenisatie en lysistijd.

    A-2 Hoeveelheid monster is te groot

    ---- Verminder de hoeveelheid gebruikt monster of verhoog de hoeveelheid lysisbuffer.

    Vraag: Lage RNA-opbrengst

    A-1 Onvoldoende cellysis of homogenisatie

    ---- Verminder het monstergebruik, verhoog de hoeveelheid lysisbuffer, verhoog de homogenisatie en lysistijd.

    A-2 Hoeveelheid monster is te groot

    ---- Raadpleeg de maximale verwerkingscapaciteit.

    A-3 RNA wordt niet volledig uit de kolom geëlueerd

    ---- Nadat u RNase-vrij water hebt toegevoegd, laat u het een paar minuten staan ​​voordat u gaat centrifugeren.

    A-4 Ethanol in het eluens

    ---- Na het spoelen nogmaals centrifugeren en de wasbuffer zoveel mogelijk verwijderen.

    A-5 Celkweekmedium is niet volledig verwijderd

    ---- Zorg er bij het verzamelen van cellen voor dat u het kweekmedium zoveel mogelijk verwijdert.

    A-6 De cellen die zijn opgeslagen in RNAstore worden niet effectief gecentrifugeerd

    ---- RNAstore-dichtheid is groter dan het gemiddelde celkweekmedium; dus de middelpuntvliedende kracht moet worden verhoogd. Er wordt voorgesteld om te centrifugeren bij 3000x g.

    A-7 Laag RNA-gehalte en overvloed in het monster

    ---- Gebruik een positief monster om te bepalen of het lage rendement door het monster wordt veroorzaakt.

    Vraag: RNA-degradatie

    A-1 Het materiaal is niet vers

    ---- Verse weefsels moeten onmiddellijk in vloeibare stikstof worden bewaard of onmiddellijk in het RNAstore-reagens worden gedaan om het extractie-effect te garanderen.

    A-2 Hoeveelheid monster is te groot

    ---- Verminder de hoeveelheid monster.

    A-3 RNase-besmettingn

    ----Hoewel de buffer in de kit geen RNase bevat, is het gemakkelijk om RNase te besmetten tijdens het extractieproces en moet het met zorg worden behandeld.

    A-4 Elektroforesevervuiling

    ---- Vervang de elektroforesebuffer en zorg ervoor dat de verbruiksartikelen en de laadbuffer vrij zijn van RNase-verontreiniging.

    A-5 Te veel belasting voor elektroforese

    ---- Verminder de hoeveelheid monsterlading, de lading van elk putje mag niet hoger zijn dan 2 μg.

    Vraag: DNA-besmetting

    A-1 Hoeveelheid monster is te groot

    ---- Verminder de hoeveelheid monster.

    A-2 Sommige monsters hebben een hoog DNA-gehalte en kunnen met DNase worden behandeld.

    ----Voer RNase-vrije DNase-behandeling uit op de verkregen RNA-oplossing, en het RNA kan direct worden gebruikt voor daaropvolgende experimenten na behandeling, of kan verder worden gezuiverd door RNA-zuiveringskits.

    V: Hoe verwijder ik RNase uit experimentele verbruiksartikelen en glaswerk?

    Voor glaswerk, gebakken op 150°C gedurende 4 uur. Voor plastic containers, gedurende 10 minuten ondergedompeld in 0,5 M NaOH, vervolgens grondig gespoeld met RNase-vrij water en vervolgens gesteriliseerd om RNase volledig te verwijderen. De reagentia of oplossingen die in het experiment worden gebruikt, met name water, moeten vrij zijn van RNase. Gebruik RNase-vrij water voor alle reagenspreparaten (voeg water toe aan een schone glazen fles, voeg DEPC toe tot een eindconcentratie van 0,1% (V/V), schud 's nachts en autoclaaf).

    Schrijf hier uw bericht en stuur het naar ons