TGuide S96 bloed/cel/weefsel RNA-kit

A-1 Cellysis of homogenisatie niet voldoende

---- Verminder het monstergebruik, verhoog de hoeveelheid lysisbuffer, verhoog de homogenisatie en lysistijd.

A-2 Hoeveelheid monster is te groot

---- Verminder de hoeveelheid gebruikt monster of verhoog de hoeveelheid lysisbuffer.

A-1 Onvoldoende cellysis of homogenisatie

---- Verminder het monstergebruik, verhoog de hoeveelheid lysisbuffer, verhoog de homogenisatie en lysistijd.

A-2 Hoeveelheid monster is te groot

---- Raadpleeg de maximale verwerkingscapaciteit.

A-3 RNA wordt niet volledig uit de kolom geëlueerd

---- Nadat u RNase-vrij water hebt toegevoegd, laat u het een paar minuten staan ​​voordat u gaat centrifugeren.

A-4 Ethanol in het eluens

---- Na het spoelen nogmaals centrifugeren en de wasbuffer zoveel mogelijk verwijderen.

A-5 Celkweekmedium is niet volledig verwijderd

---- Zorg er bij het verzamelen van cellen voor dat u het kweekmedium zoveel mogelijk verwijdert.

A-6 De cellen die zijn opgeslagen in RNAstore worden niet effectief gecentrifugeerd

---- RNAstore-dichtheid is groter dan het gemiddelde celkweekmedium; dus de middelpuntvliedende kracht moet worden verhoogd. Er wordt voorgesteld om te centrifugeren bij 3000x g.

A-7 Laag RNA-gehalte en overvloed in het monster

---- Gebruik een positief monster om te bepalen of het lage rendement door het monster wordt veroorzaakt.

A-1 Het materiaal is niet vers

---- Verse weefsels moeten onmiddellijk in vloeibare stikstof worden bewaard of onmiddellijk in het RNAstore-reagens worden gedaan om het extractie-effect te garanderen.

A-2 Hoeveelheid monster is te groot

---- Verminder de hoeveelheid monster.

A-3 RNase-besmettingn

----Hoewel de buffer in de kit geen RNase bevat, is het gemakkelijk om RNase te besmetten tijdens het extractieproces en moet het met zorg worden behandeld.

A-4 Elektroforesevervuiling

---- Vervang de elektroforesebuffer en zorg ervoor dat de verbruiksartikelen en de laadbuffer vrij zijn van RNase-verontreiniging.

A-5 Te veel belasting voor elektroforese

---- Verminder de hoeveelheid monsterlading, de lading van elk putje mag niet hoger zijn dan 2 μg.

A-1 Hoeveelheid monster is te groot

---- Verminder de hoeveelheid monster.

A-2 Sommige monsters hebben een hoog DNA-gehalte en kunnen met DNase worden behandeld.

----Voer RNase-vrije DNase-behandeling uit op de verkregen RNA-oplossing, en het RNA kan direct worden gebruikt voor daaropvolgende experimenten na behandeling, of kan verder worden gezuiverd door RNA-zuiveringskits.

Voor glaswerk, gebakken op 150°C gedurende 4 uur. Voor plastic containers, gedurende 10 minuten ondergedompeld in 0,5 M NaOH, vervolgens grondig gespoeld met RNase-vrij water en vervolgens gesteriliseerd om RNase volledig te verwijderen. De reagentia of oplossingen die in het experiment worden gebruikt, met name water, moeten vrij zijn van RNase. Gebruik RNase-vrij water voor alle reagenspreparaten (voeg water toe aan een schone glazen fles, voeg DEPC toe tot een eindconcentratie van 0,1% (V/V), schud 's nachts en autoclaaf).