RNAprep Pure Tissue Kit

Voor zuivering van maximaal 100 μg totaal RNA uit dierlijke weefsels.

De RNAprep Pure Tissue Kit biedt een snelle, eenvoudige en kosteneffectieve methode voor het zuiveren van totaal RNA uit dierlijke weefsels door gebruik te maken van een effectieve spinkolom en een uniek buffersysteem. De kit bevat RNase-Free spinkolommen CR3 voor het zuiveren van hoogwaardig RNA met behulp van silica-membraantechnologie. Hoogwaardig totaal-RNA kan in 40-50 minuten met hoge zuiverheid worden verkregen en is vrij van verontreiniging met eiwitten en genomisch DNA.

Kat. Nee	Verpakkingsgrootte:
4992236	50 voorbereidingen

Stuur een e-mail naar ons

Product detail

Experimenteel voorbeeld

FAQ

Productlabels

Functies

■ Geoptimaliseerde buffers voor dierlijke weefsels maken het proces eenvoudig en gemakkelijk.
■ Unieke DNase I minimaliseert besmetting met genomisch DNA.
■ Het hogere zuiverheids- en gebruiksklare RNA is geschikt voor gevoelige downstream-toepassingen.
■ Geen extractie met fenol/chloroform, geen neerslag van LiCl en ethanol en geen centrifugatie met CsCl-gradiënten nodig, wat het proces veilig en betrouwbaar maakt.

Toepassingen

■ RT-PCR.
■ Northern Blot, Dot Blot.
■ Realtime PCR.
■ Chipanalyse.
■ PolyA-screening, in vitro translatie, RNase-beschermingsanalyse en moleculaire klonering.

Alle producten kunnen worden aangepast voor ODM/OEM. Voor details,klik op Aangepaste Service (ODM/OEM)

Vorig: RNAprep Pure Cell/Bacteria Kit

Volgende: RNAprep Pure FFPE-kit

Materiaal: 20 mg embryo (13 dagen), 15 mg nier, 10 mg lever, 15 mg milt, 10 mg thymus, 20 mg long
Methode: Totaal RNA uit verschillende weefselmonsters van ratten werd gezuiverd met behulp van de RNAprep Pure Tissue Kit.
Resultaten: De afbeelding van de agarosegelelektroforese wordt hierboven getoond. Per baan werd 2-4 l van 100 l eluaten geladen.
M: TIANGEN DNA-marker III;
Baan 1-2: Embryo (13 dagen); Baan 3: Nier; Baan 4-6: Lever; Baan 7: Milt; Baan 8: Thymus; Baan 9: Long.
De elektroforese werd uitgevoerd bij 6 V/cm gedurende 30 min op 1% agarosegel.

V: Kolomblokkering

A-1 Cellysis of homogenisatie niet voldoende

---- Verminder het monstergebruik, verhoog de hoeveelheid lysisbuffer, verhoog de homogenisatie en lysistijd.

A-2 Hoeveelheid monster is te groot

---- Verminder de hoeveelheid gebruikt monster of verhoog de hoeveelheid lysisbuffer.

Vraag: Lage RNA-opbrengst

A-1 Onvoldoende cellysis of homogenisatie

---- Verminder het monstergebruik, verhoog de hoeveelheid lysisbuffer, verhoog de homogenisatie en lysistijd.

A-2 Hoeveelheid monster is te groot

---- Raadpleeg de maximale verwerkingscapaciteit.

A-3 RNA wordt niet volledig uit de kolom geëlueerd

---- Nadat u RNase-vrij water hebt toegevoegd, laat u het een paar minuten staan voordat u gaat centrifugeren.

A-4 Ethanol in het eluens

---- Na het spoelen nogmaals centrifugeren en de wasbuffer zoveel mogelijk verwijderen.

A-5 Celkweekmedium is niet volledig verwijderd

---- Zorg er bij het verzamelen van cellen voor dat u het kweekmedium zoveel mogelijk verwijdert.

A-6 De cellen die zijn opgeslagen in RNAstore worden niet effectief gecentrifugeerd

---- RNAstore-dichtheid is groter dan het gemiddelde celkweekmedium; dus de middelpuntvliedende kracht moet worden verhoogd. Er wordt voorgesteld om te centrifugeren bij 3000x g.

A-7 Laag RNA-gehalte en overvloed in het monster

---- Gebruik een positief monster om te bepalen of het lage rendement door het monster wordt veroorzaakt.

Vraag: RNA-degradatie

A-1 Het materiaal is niet vers

---- Verse weefsels moeten onmiddellijk in vloeibare stikstof worden bewaard of onmiddellijk in het RNAstore-reagens worden gedaan om het extractie-effect te garanderen.

A-2 Hoeveelheid monster is te groot

---- Verminder de hoeveelheid monster.

A-3 RNase-besmettingn

----Hoewel de buffer in de kit geen RNase bevat, is het gemakkelijk om RNase te besmetten tijdens het extractieproces en moet het met zorg worden behandeld.

A-4 Elektroforesevervuiling

---- Vervang de elektroforesebuffer en zorg ervoor dat de verbruiksartikelen en de laadbuffer vrij zijn van RNase-verontreiniging.

A-5 Te veel belasting voor elektroforese

---- Verminder de hoeveelheid monsterlading, de lading van elk putje mag niet hoger zijn dan 2 μg.

Vraag: DNA-besmetting

A-1 Hoeveelheid monster is te groot

---- Verminder de hoeveelheid monster.

A-2 Sommige monsters hebben een hoog DNA-gehalte en kunnen met DNase worden behandeld.

----Voer RNase-vrije DNase-behandeling uit op de verkregen RNA-oplossing, en het RNA kan direct worden gebruikt voor daaropvolgende experimenten na behandeling, of kan verder worden gezuiverd door RNA-zuiveringskits.

V: Hoe verwijder ik RNase uit experimentele verbruiksartikelen en glaswerk?

Voor glaswerk, gebakken op 150°C gedurende 4 uur. Voor plastic containers, gedurende 10 minuten ondergedompeld in 0,5 M NaOH, vervolgens grondig gespoeld met RNase-vrij water en vervolgens gesteriliseerd om RNase volledig te verwijderen. De reagentia of oplossingen die in het experiment worden gebruikt, met name water, moeten vrij zijn van RNase. Gebruik RNase-vrij water voor alle reagenspreparaten (voeg water toe aan een schone glazen fles, voeg DEPC toe tot een eindconcentratie van 0,1% (V/V), schud 's nachts en autoclaaf).

Schrijf hier uw bericht en stuur het naar ons